双分子荧光互补（Bimolecular Fluorescent Complimentary, BiFC）技术可用于体外检测蛋白质的相互作用，其原理是将荧光蛋白在合适的位置切开，形成不发荧光的两个多肽VN和VC，这两个多肽片段在细胞内共表达或体外混合时，不能自发地组装成完整的荧光蛋白且在该荧光蛋白的激发光激发时不能产生荧光。随后分别将两段多肽与诱饵蛋白和捕获蛋白融合，如果捕获蛋白和诱饵蛋白能发生相互作用，那么不完整的两段荧光片段就会相互靠近，融合成具有活性的荧光蛋白，在该荧光蛋白的激发光激发时能产生荧光。最后通过荧光显微镜观察是否存在荧光，即可判断诱饵蛋白和捕获蛋白是否存在相互作用。